सबसे पहले, अपकेंद्रित्र समय
केन्द्रापसारक समय केन्द्रापसारक प्रभाव को प्रभावित करने वाला एक बहुत ही महत्वपूर्ण कारक है। अलग-अलग सेंट्रीफ्यूगेशन विधियों के लिए आवश्यक सेंट्रीफ्यूगेशन समय अलग-अलग होगा। निम्नलिखित अंतर सेंट्रीफ्यूगेशन और समान घनत्व ग्रेडिएंट सेंट्रीफ्यूगेशन और घनत्व ग्रेडिएंट सेंट्रीफ्यूजेशन का विस्तृत परिचय है। डिफरेंशियल सेंट्रीफ्यूजेशन के लिए, सेंट्रीफ्यूजेशन टाइम उस समय को संदर्भित करता है जब एक निश्चित कण पूरी तरह से सेंट्रीफ्यूज ट्यूब के नीचे बैठ जाता है; आइसो-घनत्व ग्रेडिएंट सेंट्रीफ्यूजेशन के लिए, सेंट्रीफ्यूगेशन समय उस संतुलन समय को संदर्भित करता है जिस पर कण पूरी तरह से आइसो-घनत्व बिंदु तक पहुंच जाता है; एक घनत्व ढाल सेंट्रीफ्यूगेशन का सेंट्रीफ्यूगेशन समय एक अच्छी तरह से परिभाषित क्षेत्र बनाने के समय को संदर्भित करता है। बाद के दो केंद्रीकरण विधियों के लिए, आवश्यक क्षेत्र गठन समय या संतुलन समय जटिल है और परीक्षण के बाद निर्धारित किया जा सकता है।
दूसरा, केन्द्रापसारक गति
अपकेंद्रित्र की घूर्णन गति मुख्य रूप से रोटर की घूर्णन गति और कणों के घूर्णन की त्रिज्या द्वारा निर्धारित की जाती है। केन्द्रापसारक स्थितियों का वर्णन करते समय, यह अक्सर सापेक्ष केन्द्रापसारक बल क्षेत्र द्वारा व्यक्त किया जाता है। वास्तविक कार्य में, केन्द्रापसारक बल क्षेत्र का डेटा औसत मूल्य को संदर्भित करता है, अर्थात, केन्द्रापसारक समाधान में बिंदु पर कणों के केन्द्रापसारक बल क्षेत्र को संदर्भित करता है।
तीसरा, अपकेंद्रित्र माध्यम का पीएच और तापमान
सेंट्रीफ्यूगेशन माध्यम का पीएच मान आम तौर पर पीएच रेंज में सेट होता है जिसमें एंजाइम स्थिर होता है। एक बफर समाधान का उपयोग किया जा सकता है। परीक्षण में, वजन का प्रदर्शन किया जाता है, और सेंट्रीफ्यूज के वातावरण को पेरासिड या ओवर-बेस के वातावरण से बचाकर खुद को ढाला जाता है।
अपकेंद्रित्र के साथ काम करते समय, केन्द्रापसारक माध्यम की पसंद पर विशेष ध्यान देने के अलावा, हमें अलग-अलग पदार्थों के एग्लूटिनेशन, विकृतीकरण और निष्क्रियता को रोकने के लिए तापमान और मध्यम समाधान के पीएच को भी नियंत्रित करना चाहिए। हम सेंट्रीफ्यूगेशन तापमान को लगभग 4 ° C तक नियंत्रित करेंगे। अच्छी तापीय स्थिरता वाले कुछ एंजाइमों के लिए, कमरे के तापमान पर सेंट्रीफ्यूगेशन भी किया जा सकता है।